- Domů
- MolBoolean™
MolBoolean™
MolBoolean™ je inovativní technologie in situ proximální detekce vyvinutá společností Atlas Antibodies, která umožňuje současnou detekci volných i interagujících frakcí dvou proteinových cílů v buňkách a tkáních.
✨ Hlavní výhody:
- 📊 Komplexní analýza: Umožňuje kvantitativní analýzu interakcí proteinů při současné detekci volných a vázaných forem.
- 🎯 Přesná kvantifikace: Normalizace interakčních dat vůči celkovým hladinám cílových proteinů zajišťuje vysokou přesnost.
- 🔬 Biologická relevance: Nevyžaduje genetickou modifikaci nebo přizpůsobení proteinové exprese.
- 💡 Citlivost: Díky technologii Rolling Circle Amplification (RCA) zvyšuje signál až 1000násobně, což umožňuje detekci i velmi nízkých koncentrací proteinů.
- 🔧 Flexibilita: Kompatibilní s různými primárními protilátkami, což umožňuje přizpůsobení různým výzkumným potřebám.
- ✅ Ověřeno: Validováno pro použití v buněčných kulturách i tkáních.
MolBoolean™ představuje výkonný nástroj pro studium proteinových interakcí s vysokou citlivostí a přesností — ideální pro pokročilé aplikace v oblasti molekulární biologie a biomedicínského výzkumu. 🚀
Proč si vybrat MolBoolean?
MolBoolean je inovativní nástroj pro detekci protein-proteinových interakcí s řadou výhod:
- Umožňuje detekovat jak volné, tak interagující proteiny.
- Nabízí vysoce citlivou detekci s výrazným zesílením signálu.
- Umožňuje normalizaci dat pro přesnější výsledky.
- Je kompatibilní se stávajícími protilátkami a protokoly.
- Má intuitivní pracovní postup vhodný i pro standardní laboratoře.
Skvělá volba pro výzkum proteinové dynamiky, detekci nízko zastoupených proteinů a studium interakcí na molekulární úrovni.
Pracovní postup
MolBoolean™ Mouse/Rabbit je sada pro in situ analýzu proteinové blízkosti v tkáních a buňkách. Využívá speciální oligonukleotidové uspořádání, které umožňuje simultánní detekci volných a interagujících frakcí (přibližně 40 nm blízkost) pro dva proteiny zájmu (protein A, protein B a jejich interakce AB).
Detekce probíhá pomocí dvou různých imunofluorescenčních detekčních reportérů s maximálními emisními vlnovými délkami:
- 590 nm (ATTO565, filtr TxRed nebo podobný)
- 664 nm (ATTO647N, filtr Y5 nebo podobný)
Sadu lze použít s vlastními primárními protilátkami uživatele (získanými z myši a králíka). MolBoolean využívá sekundární protilátkové sondy a rolling circle amplification (RCA) pro zesílení signálu.
Co obsahuje sada MolBoolean™?
Sada obsahuje 15 samostatných zkumavek s enzymy, pufry, oligonukleotidy a dalšími reagenciemi:
Celkový objem sady je 4,8 ml, což vystačí přibližně na:
- 120 analýz v buňkách (40 μl/analýzu)
- 60 analýz v tkáních (80 μl/analýzu)
- Blokátor (4x)
- Ředicí roztok (1x)
- Sonda A (80x)
- Sonda B (80x)
- DNA kruh (40x)
- Přídavná látka (40x)
- Pufr A (10x)
- Enzym štěpící DNA (80x)
- Pufr B (8x)
- Oligonukleotidové značky (40x)
- Ligáza (80x)
- Polymeráza (40x)
- Pufr C (5x)
- Detekční oligonukleotidy (40x)
- Pufr D (10x)
Kroky a pracovní postup MolBoolean™
Celý postup trvá 2 dny a zahrnuje 7 kroků:
Den 1 (2 hodiny): Blokace a inkubace s primárními protilátkami.
Den 2 (7–8 hodin): Vazba sond, označení, zesílení a detekce.
1️⃣ Vazba sond blízkosti na primární protilátky navázané na proteiny.
2️⃣ Sondy se napojí na kruhovou DNA.
3️⃣ Štěpení DNA připraví molekulu pro označení.
4️⃣ Přidání oligonukleotidových značek k označení proteinů.
5️⃣ Ligace DNA spojuje segmenty DNA.
6️⃣ Rolling circle amplification (RCA) zesiluje signál pro snazší detekci.
7️⃣ Detekce odhaluje jak interagující, tak volné proteiny.